Эта процедура основана на усовершенствованном ферментативном методе, первоначально разработанном для определения креатинина в сыворотке и моче. Тест проводится в два этапа. На первом этапе креатин удаляется в течение первых минут преинкубации образца с креатиназой. На втором этапе добавление креатининазы, выступающей также в качестве стартера реакции, гидролизует креатинин образца в присутствии саркозиновой оксидазы (Sar OD) с образованием перекиси водорода.
Креатинин + H2O Креатин
Саркозин + H2O + O2 H2O2 + Глицин + HCHO
Перекись водорода, образующаяся в результате оксидазной реакции, очищается с помощью реакции Триндера, в которой хромогенное производное HTIB и 4-аминоантипирин (4-AA) конденсируются в присутствии пероксидазы (POD) с образованием красного хинонеиминового красителя.
4-AA + HTIB Красный хинонеимин + H2O
Скорость развития окраски пропорциональна концентрации креатинина в образце.
---