Пятно Ван Гизона обычно используется для окрашивания коллагеновых волокон. Коллагеновое волокно распределено наиболее широко и максимально среди трех волокон.
Принцип:
Двойное окрашивание, основанное на различном сродстве фуксина и пикриновой кислоты к коллагеновым и мышечным волокнам. Коллагеновые волокна связывают фуксин и становятся от красного до розового цвета, а мышечные волокна связывают пикриновую кислоту и становятся желтыми.
Методы:
1. Фиксируйте ткани в 10% формальдегиде, гидратируйте обычным способом и встраивайте.
2. Депарафинизируйте ткани в воде.
3. Окрашивайте железным гематоксилином Вейгерта в течение 5~10 минут. Промыть в воде.
4. Быстро дифференцируйте в 1% солянокислом этаноле. Промыть в проточной воде в течение нескольких минут.
5. Окрашивайте в растворе Ван Гизона в течение 1~2 минут.
6. Удалите пятно и быстро продифференцируйте в 95% этаноле в течение нескольких секунд.
7. Обезвожьте в абсолютном этаноле и очистите в ксилоле. Закрепите с помощью монтажной среды.
Осторожно:
1. Раствор железного гематоксилина Вейгерта готовится путем смешивания равных частей раствора А и раствора В перед использованием. Не смешивайте их заранее, иначе они окислятся и выпадут в осадок, что приведет к потере способности к окрашиванию.
2. После окрашивания VG быстро продифференцируйте ткань в 95% этаноле.
3. Поскольку фуксин растворим в воде, после окрашивания в растворе VG не промывайте ткань в воде. Вместо этого добавьте 95 % этанол непосредственно к дифференцируемой ткани, а затем обезвожьте ее в абсолютном этаноле. В противном случае цвета от окрашивания VG ослабнут или обесцветятся.
---