Ферроцианид калия предназначен для окрашивания гемосидерина и дифференциации гемосидерина от других пигментов.
Принцип действия:
Железо из тканей (в железистом состоянии) может быть высвобождено из белка разбавленной соляной кислотой. Затем оно вступает в реакцию с ферроцианидом калия, образуя синий ферроцианид, что известно как реакция берлинской лазури.
Методы:
1. Зафиксируйте ткани в 10% нейтральном буферном формальдегиде. Обезвоживают обычным способом и встраивают.
2. Депарафинизируйте ткани в дистиллированной воде. Промойте дистиллированной водой еще раз.
3. Смешайте равные объемы 2% ферроцианида калия и 2% соляной кислоты. Капните смесь на предметные стекла на 20-30 минут. Промойте дистиллированной водой.
4. Контрастируйте в растворе Nuclear Fast Red в течение 5~10 минут и кратковременно промойте дистиллированной водой.
5. Обезвожьте в 95% этаноле и абсолютном этаноле, очистите в ксилоле и смонтируйте с помощью монтажной среды.
Меры предосторожности:
1. Ткани следует фиксировать нейтральным забуференным формальдегидом. Если используется обычный формальдегид, то перед встраиванием ткани следует фиксировать в течение более короткого времени. Ткани, фиксированные в обычном формальдегиде в течение длительного времени, плохо реагируют. Избегайте использования фиксаторов, содержащих хромат.
2. Предпочтительно использовать соляную кислоту аналитического класса или выше, так как соляная кислота более низкого класса обычно содержит примеси железа, что может привести к ложноположительным результатам.
3. Все контейнеры/инструменты, используемые в ходе всей процедуры, должны быть чистыми. Избегайте использования любых железных инструментов.
4. На этапах, предшествующих реакции на железо, промывайте только дистиллированной водой, чтобы предотвратить соединение железа в водопроводной воде с солью кальция в тканях, что приводит к ложноположительным результатам.
---