Масляный красный предназначен для окрашивания нейтрального жира.
Принцип действия:
Считается, что окрашивание липидов связано с физическими свойствами раствора или адсорбцией. Красители обладают большей растворимостью в липоидных веществах замороженных тканей, чем в исходных растворителях. Поэтому во время окрашивания красители будут мигрировать в липиды из органических растворителей, что приведет к окрашиванию липидов.
Методы:
1. Замороженную ткань нарезают толщиной 6~10 мкм, коротко промывают в дистиллированной воде.
2. Промойте ткань в 60% изопропаноле в течение 20-30 секунд.
3. Приготовьте рабочий раствор Oil Red O из 6 мл исходного раствора Oil Red O и 4 мл деионизированной воды. Хорошо перемешайте и выдержите 10 минут. Окрашивайте ткани в рабочем растворе Oil Red O в течение 5~10 минут.
4. Промойте в 60% изопропаноле в течение нескольких секунд, чтобы удалить излишки красителя. Промойте в дистиллированной воде.
5. Окрасьте ядра в растворе гематоксилина Майера.
6. Дифференцируйте слайды в 1% соляной кислоте в течение нескольких секунд.
7. Посинейте в водопроводной воде или в разбавленном растворе карбоната лития в течение 10 минут. Удалите излишки воды.
8. Закрепите арабинаном или глицериновым желе.
Осторожно:
1. Для отображения липидов окрашивайте замороженные ткани, а не парафиновые, так как липиды легко растворяются в органических растворителях.
2. Замороженная ткань, используемая для окрашивания липидов, не должна быть слишком тонкой. В противном случае содержание липидов будет потеряно.
3. Время окрашивания гематоксилином Майера не должно быть слишком долгим.
4. Окрашивание не будет длиться слишком долго, поэтому наблюдайте и фотографируйте как можно скорее.
---