Стандарты количественной оценки библиотек NGS с праймерами для ПЦР (для платформы illumina) были разработаны для количественной оценки концентрации библиотек NGS для платформы секвенирования illumina. Он состоит из стандартов библиотеки (шесть 10-кратных разведений) и смеси праймеров.
Количественная концентрация амплифицируемых молекул в библиотеке NGS имеет решающее значение для качества данных секвенирования. Адекватная концентрация библиотеки позволяет максимально увеличить производительность секвенирования. Плохая концентрация библиотеки приводит к низкой или высокой плотности кластеров на проточной кювете, что может привести к низкой производительности секвенирования.
Измерение концентрации NGS-библиотеки стандартными методами количественного определения ДНК, такими как спектрофотометр или флуорометр, не является точным. QPCR - лучший способ количественного определения библиотек с высокой последовательностью и воспроизводимостью количественного определения библиотек.
Наш реагент представляет собой высокочувствительный метод количественного определения на основе ПЦР в реальном времени, специально разработанный для библиотек NGS, использующих платформу секвенирования illumina. В качестве праймеров для амплификации используются последовательности адаптеров illumina, и амплифицируются только полностью лигированные адаптерами библиотеки. Поэтому реагент обеспечивает точную оценку концентрации библиотеки на основе истинных последовательностей библиотек illumina. Кроме того, этот набор можно использовать для подтверждения реакции лигирования после завершения подготовки библиотеки.
Наши стандарты количественной оценки библиотек совместимы с коммерческими QPCR-реагентами на основе SYBR Green. Это делает его более гибким для ученых, которые хотят использовать свои реагенты для ПЦР в реальном времени. Количественное определение концентрации библиотеки достигается путем сравнения со стандартной кривой, построенной на основе библиотечных стандартов.
---