Для количественного определения липазы в сыворотке или плазме. Только для диагностики in vitro.
ИСТОРИЯ МЕТОДА
Данный метод основан на расщеплении специфического хромогенного субстрата липазы 1,2-О-дилаурил-рак-глицеро-3-глутаровой кислоты-(6-метилрезоруфин) эфиром, эмульгированным желчными кислотами. Активность панкреатического фермента определяется именно комбинацией желчной кислоты и колипазы, используемой в данном анализе. В отсутствие колипазы практически не обнаруживается липазная активность. Колипаза активирует только панкреатическую липазу, но не другие липолитические ферменты, обнаруженные в сыворотке крови. Большое количество холатов гарантирует, что эстеразы, присутствующие в сыворотке, не реагируют с хромогенным субстратом из-за сильно отрицательного поверхностного заряда.
ПРИНЦИП
При щелочном pH субстрат красителя липазы 1,2-О-дилаурил-рак -глицеро - 3 - глутаровая кислота - (6-метил-резоруфин) эфир расщепляется под каталитическим действием панкреатической липазы с образованием 1,2-О-дилаурил-рак-глицерола и нестабильного соединения глутаровая кислота-(6-метил-резоруфин) - эфир. В щелочном растворе это соединение разлагается на глутаровую кислоту и метилрезоруфин. Интенсивность цвета образующегося красного красителя прямо пропорциональна активности липазы. Эта активность может быть измерена при длине волны 578 нм.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Реактивы содержат азид натрия в концентрации 0,09%.
2. Обращайтесь с ними осторожно. Утилизация остатков должна производиться в соответствии с местными нормативными актами.
Концентрации гемоглобина выше 400 мг/дл и билирубина выше 60 мг/дл могут помешать проведению анализа. Для проведения данного теста настоятельно рекомендуется использовать одноразовую лабораторную посуду.
---