Реактив красящий раствор Von Kossa

для цитологиидля гистологии

Препарат для подготовки цитогистологических образцов для оптической микроскопии. Для демонстрации отложения ионов кальция в срезах тканей. ПРИНЦИП Этот метод основан на реакции замещения. Ткань обрабатывается раствором нитрата серебра; катионное серебро замещает кальций в исходной соли, образуя серебряную соль, которая может быть показана восстановлением до металлического серебра. Реакция протекает следующим образом: CaCO3 + AgNO3 = Ag2CO3 + Ca(NO3)2 Ag2CO3 + 2H + = 2Ag + H2O + CO2 Соли кальция, способные реагировать с нитратом серебра, - это карбонат, фосфат, оксалат, сульфат, урат, хлорид, сульфоцианид. Поскольку кальций присутствует в тканях млекопитающих в основном в виде карбоната и фосфата кальция, этот метод подходит для его выявления. Для предотвращения ложных результатов, вызванных присутствием в тканях мочевой кислоты и уратов, эти соли были солюбилизированы в насыщенном растворе карбоната лития. МЕТОД 1) Поместите образец в дистиллированную воду. 2) Нанесите на участок 10 капель реагента А: оставьте действовать на 10 минут. 3) Хорошо промойте в дистиллированной воде. 4) Нанесите на участок 10 капель реагента B: оставьте действовать в темноте на 1 час. 5) Хорошо промойте в дистиллированной воде. 6) Поместите на секцию 10 капель дистиллированной воды и добавьте 10 капель реагента С: оставьте действовать на 5 минут (пока соли серебра не почернеют). 7) Промойте в дистиллированной воде. 8) Поместите на секцию 10 капель реагента D: оставьте на 5 минут. 9) Промойте в дистиллированной воде. 10) Нанесите на секцию 10 капель реагента E: оставьте на 5 минут. 11) Промойте в дистиллированной воде и обезвожьте в спиртах по возрастанию, очистите в ксилоле и смонтируйте.