Набор реагентов предназначен для определения однонуклеотидного полиморфизма гена MCM6 - 13910C/T методом ПЦР в реальном времени с детекцией кривых плавления. Наборы содержат реагенты только для ПЦР в реальном времени.
Введение
набор "MOLgen Genetics MCM6 Kit" предназначен для определения однонуклеотидного полиморфизма -13910 C/T в гене MCM6 (регуляторный участок гена LCT, кодирующий лактазу) в клинических образцах (цельная кровь, буккальный эпителий) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени с анализом кривых плавления.
Выделение ДНК из клинических образцов может быть проведено с помощью набора "MOLgen Universal Extraction Kit" производства Adaltis S.r.l.
Результаты ПЦР-анализа учитываются в комплексной диагностике заболеваний.
Набор предназначен для использования с блочными ПЦР-циклерами: AMPLIlab (Adaltis), CFX96 (Bio-Rad, США).
Набор содержит реагенты, необходимые для 48 тестов, включая контрольные образцы.
Принцип метода
Принцип метода основан на амплификации выбранного участка ДНК человека с последующим образованием гибридных дуплексов продукта ПЦР со специфическим ДНК-зондом и выявлением кривых плавления дуплексов.
Этап амплификации состоит из повторяющихся циклов: температурная денатурация ДНК-шаблона, отжиг праймеров к специфическим участкам ДНК-шаблона и удлинение праймеров с помощью Taq-полимеразы.
После этапа амплификации температура понижается, и специфический ДНК-зонд с флуоресцентной меткой гибридизуется с ампликоном, меченным гасителем, что приводит к уменьшению флуоресцентного сигнала. На этапе плавления ДНК-зонд высвобождается, что приводит к увеличению флуоресценции.
---