Набор реактивов в растворе E.Z.N.A.®

для PCRдля нуклеиновых кислотбактерии

Выделение плазмидной ДНК с низким содержанием эндотоксина (<1EU/мкг) из бактериальных культур объемом до 5 мл с помощью спиновых мини-колонок Обзор Плазмида, выделенная с помощью традиционных процедур очистки, обычно содержит высокий уровень эндотоксинов (также известных как липополисахариды или LPS), которые могут существенно помешать проведению экспериментов по трансфекции. Для плазмид с высоким числом копий можно использовать до 5 мл ночных культур, а для плазмид с низким числом копий - до 10 мл. E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit I включает эффективный этап удаления эндотоксина в процедуру очистки плазмиды для получения высококачественной плазмиды трансфекционного класса (<0,1 EU/мкг) для эффективной трансфекции. Бактериальные клетки лизируются с помощью метода щелочного лизиса SDS. Очищенный лизат клеток затем обрабатывается реагентом ETR для эффективного удаления эндотоксинов. После настройки условий связывания клеточный лизат наносят на колонку HiBind® DNA и очищенная ДНК элюируется с мембраны колонки. Быстро - 30 минут или меньше Безопасно - без экстракции фенолом/хлороформом Универсальность - доступны спиновые и вакуумные форматы Высокое качество - Эндотоксины эффективно снижены (<0,1 EU/мкг) Технические характеристики ОСОБЕННОСТИ - ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Применение - Трансфекция чувствительных клеточных линий; генная терапия и т.д. Исходный материал - 1-5 мл LB культуры с OD600 от 2 до 3; или эквивалент Тип плазмиды - Высококопийная, низкокопийная, космидная ДНК Режим обработки - Ручной, центрифугирование Производительность - 1 - 24 Технология связывания ДНК - Silica mini spin column Метод очистки лизата - Центрифугирование Время обработки - <30 минут Выход - 15-25 мкг при высоком количестве копий; 0,1-5 мкг при низком количестве копий Прочее - Включает этап удаления эндотоксина