Выделение плазмидной ДНК с низким содержанием эндотоксина (<1EU/мкг) из бактериальных культур объемом до 200 мл с помощью колонок spin maxi
Обзор
Набор E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Maxi Kit обеспечивает эффективный метод крупномасштабного выделения плазмидной ДНК с низким содержанием эндотоксина. В системе используются фильтрующие шприцы для очистки лизата вместо центрифугирования для быстрой очистки бактериальных лизатов после щелочного лизиса. После очистки лизата удаляются эндотоксины, и протокол следует простой процедуре "смыв-вымывание-вымывание" для получения высококачественной плазмидной ДНК. Выход варьируется в зависимости от числа копий плазмид, штамма E. coli и условий роста. 50-200 мл бактериальной культуры в среде LB обычно дают 0,6-1,2 мг плазмидной ДНК с высоким числом копий. При работе с плазмидой с низким числом копий может быть обработано до 500 мл культуры. Система использует центрифугирование или вакуумную технологию для очистки плазмиды и исключает трудоемкие гравитационные колонки, требующие осаждения спиртом. Очищенная плазмидная ДНК подходит для чувствительных последующих приложений, таких как трансфекция клеток млекопитающих, клонирование, автоматизированное флуоресцентное секвенирование ДНК (типичные чтения превышают 800 п.н.), секвенирование следующего поколения, переваривание ферментами рестрикции, лигирование, ПЦР, транскрипция in vitro, трансформация и т.д.
Быстрота - очистка плазмидной ДНК за < 45 минут
Безопасно - Без экстракции фенолом/хлороформом
Универсальность - Доступны спиновые и вакуумные форматы
Высокое качество - Трансфекционная плазмидная ДНК с низким содержанием эндотоксинов (< 1 EU/мкг)
Технические характеристики
Не для использования в диагностических процедурах.
ОСОБЕННОСТИ - СПЕЦИФИКАЦИИ
Применение - Трансфекция, генная терапия, клонирование, транскрипция in vitro, Next-Generation
---