Выделение до 200 мкг трансфекционной плазмидной ДНК с низким содержанием эндотоксинов (<1EU/мкг) из 15-50 мл бактериальных культур с использованием шприцевых фильтров для очистки лизата и спиновых колонок midi
Обзор
Набор E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Midi Kit обеспечивает эффективный метод крупномасштабного выделения плазмидной ДНК с низким содержанием эндотоксина. В системе используются фильтрующие шприцы для очистки лизата вместо центрифугирования для быстрой очистки бактериальных лизатов после щелочного лизиса. После очистки лизата удаляются эндотоксины, и протокол следует простой процедуре "смыв-вымывание-вымывание" для получения высококачественной плазмидной ДНК. Выход варьируется в зависимости от числа копий плазмид, штамма E. coli и условий роста. 15-50 мл бактериальной культуры в среде LB обычно дают до 200 мкг плазмидной ДНК с высоким числом копий. При работе с плазмидой с низким числом копий может быть обработано до 100 мл культуры. Система использует центрифугирование или вакуумную технологию для очистки плазмиды и исключает трудоемкие гравитационные колонки, требующие осаждения спиртом. Очищенная плазмидная ДНК подходит для чувствительных последующих приложений, таких как трансфекция клеток млекопитающих, клонирование, автоматизированное флуоресцентное секвенирование ДНК (типичные чтения превышают 800 п.н.), секвенирование следующего поколения, переваривание ферментами рестрикции, лигирование, ПЦР, транскрипция in vitro, трансформация и т.д.
Быстрота - очистка плазмидной ДНК за < 45 мин
Безопасно - Без экстракции фенолом/хлороформом
Универсальность - Доступны спиновые и вакуумные форматы
Высокое качество - Трансфекционная плазмидная ДНК с низким содержанием эндотоксинов (< 1 EU/мкг)
Технические характеристики
Не для использования в диагностических процедурах.
---