Набор реактивов в растворе NZYGigaprep

буферный раствордля транскрипции in vitroEscherichia coli (кишечная палочка)

Набор NZYGigaprep позволяет быстро получить крупномасштабную высокочистую плазмидную ДНК из штаммов E. coli. Подробности Набор NZYGigaprep предназначен для быстрого и масштабного получения высокочистой плазмидной ДНК. Набор был оптимизирован для получения, как правило, 2-10 миллиграммов ДНК из плазмид с высоким числом копий или от 500 микрограммов до 2 миллиграммов нуклеиновой кислоты из плазмид с низким числом копий, полученных из рекомбинантных штаммов Escherichia coli. Наш набор упрощает процесс благодаря модифицированной процедуре лизиса с использованием щелочи и ССД. Эта процедура подготавливает гранулу бактериальных клеток к очистке плазмид. Она включает денатурацию хромосомной и плазмидной ДНК в щелочных условиях. Затем введение ацетата калия инициирует образование преципитата, содержащего хромосомную ДНК и другие клеточные компоненты. Одновременно буфер с ацетатом калия нейтрализует лизат, позволяя плазмидной ДНК вернуться в свое родное сверхсвернутое состояние, удерживая ее в растворе. После уравновешивания колонки эквилибровочным буфером плазмидная ДНК избирательно связывается с анионообменной смолой. После тщательной промывки колонки плазмидная ДНК эффективно очищается и готова к элюированию. Простой этап осаждения позволяет собрать элюированную ДНК, которую затем можно легко растворить в буфере ТЕ для последующего использования. Очищенная ДНК хорошо подходит для самых сложных задач молекулярной биологии, включая трансфекцию, транскрипцию in vitro, автоматическое флуоресцентное или ручное секвенирование, клонирование, ПЦР и гибридизацию. Для выделения ДНК из плазмид, BACs или космид с низким числом копий удвойте объемы буферов M1, M2 и M3