Набор для мутагенеза NZYSupreme предназначен для создания точечных мутаций, удаления или вставки одного или нескольких нуклеотидов в последовательности ДНК. Для работы системы необходимо предоставить два синтетических олигонуклеотидных праймера, содержащих желаемую мутацию.
Подробности
Набор для мутагенеза NZYSupreme представляет собой простой и высокоэффективный метод генерации точечных мутаций, удаления/вставки одного или нескольких нуклеотидов в плазмидную ДНК любого типа с помощью ПЦР. Этот набор для мутагенеза был недавно разработан с целью сокращения рабочего времени и повышения эффективности редактирования ДНК. Система требует предоставления двух синтетических частично комплементарных олигонуклеотидных праймеров, содержащих желаемую мутацию. Включение этих мутировавших олигонуклеотидных праймеров в ДНК-полимеразу Supreme NZYProof - инженерную высокоточную полимеразу - приводит к образованию мутировавшей плазмиды со ступенчатыми никами, которая устойчива к перевариванию Dpn I (поскольку синтетическая ДНК не метилирована). После обработки Dpn I полученная мутированная плазмида восстанавливается путем трансформации компетентных клеток NZYStar. Схематичное представление протокола мутагенеза приведено на рис. 1. ДНК, выделенная из штаммов Dam- Escherichia coli, в том числе JM101 и SCS110, не является подходящим шаблоном для реакции мутагенеза.
Компоненты
- Бесцветная мастер-смесь Supreme NZYProof 2x
- Dpn I (10 U/µL)
- Контрольная плазмида
- Смесь праймеров для контроля мутагенеза
- Компетентные клетки Контрольная плазмида (0,1 нг/мкл) (*)
(*) поставляется только в наборе MB44702
Дополнительная информация
Условия доставки
Сухой лед
Применение
Сайт-направленный мутагенез
Характеристики
Мутагенез плазмид размером <15 кб; Быстрота
Категория продукта
Клонирование ДНК и мутагенез
---