Набор NZY M-MuLV First-Strand cDNA Synthesis Kit представляет собой систему, включающую все необходимые компоненты для синтеза кДНК первой нити, кроме шаблонной РНК.
Подробности
Набор NZY M-MuLV First-Strand cDNA Synthesis Kit, отдельные олиго, представляет собой систему, включающую все необходимые компоненты для синтеза кДНК первой очереди, кроме шаблонной РНК. Случайные гексамеры и праймеры Oligo(dT)18 поставляются в отдельных пробирках, что обеспечивает удобство выбора подходящего праймера для начала реакции обратной транскрипции. Полученная одноцепочечная кДНК пригодна для использования в количественной обратной транскрипционной ПЦР в реальном времени (RT-qPCR). Набор для синтеза одноцепочечной кДНК NZY M-MuLV First-Strand cDNA Synthesis Kit, separate oligos, предназначен для получения высоких выходов полноразмерных кДНК-продуктов и повышения чувствительности RT-qPCR. Исходный материал может составлять от 10 пг до 5 мкг тотальной РНК. Помимо случайных гексамеров и праймеров Oligo(dT)18, в состав набора входят NZYRT 2× Master Mix, без олигомеров, содержащий dNTPs, MgCl2 и оптимизированный RT-буфер; 10× Annealing Buffer и NZYM-MuLV RT Enzyme Mix. Смесь ферментов NZYM-MuLV RT Enzyme Mix включает обратную транскриптазу NZY M-MuLV (RNase H minus) и ингибитор рибонуклеазы NZY для защиты РНК от деградации под действием рибонуклеазы. РНКаза H (из E. coli) поставляется в отдельной пробирке для специфической деградации РНК-шаблона в гибридах кДНК-РНК после синтеза кДНК с первой нитью. Эта процедура повышает чувствительность последующих реакций RT-qPCR, поскольку ПЦР-праймеры легче связываются с кДНК.
Компоненты
- Смесь ферментов NZYM-MuLV RT
- NZYRT 2x Master Mix, без олигосом
- 10× Буфер для отжига
- Смесь случайных гексамеров (50 нг/мкл)
---