Набор T7 High Yield RNA Synthesis Kit оптимизирует систему реакции транскрипции. Набор позволяет эффективно синтезировать одноцепочечную РНК, используя РНК-полимеразу T7, линейную двухцепочечную ДНК с последовательностью промотора T7 в качестве шаблона, NTPs в качестве субстрата для контроля последовательности ДНК ниже по течению от промотора. Во время транскрипции к субстрату могут быть добавлены модифицированные нуклеотиды для приготовления РНК, меченной биотином или красителем.
Этот набор может синтезировать длинные транскрипты и короткие транскрипты, РНК может быть получено 100-200 мкг при вводе 1 мкг шаблона ДНК. РНК, синтезированная путем транскрипции, может быть использована для различных последующих приложений, таких как исследование структуры и функции РНК, защита РНК, гибридизация зондов, RNAi, микроинъекция и трансляция in vitro.
Характеристика
До 180 мкг РНК за реакцию из 1 мкг контрольного шаблона
Оптимизированная реакционная система для процесса IVT
Снижение производства дсРНК
Более высокая целостность и чистота РНК
Вопросы и ответы:
1. Низкий выход транскриптов
Качество шаблона тесно связано с выходом. Если выход экспериментальной группы значительно ниже, чем контрольной, возможными причинами являются:
① экспериментальный шаблон содержит ингибирующие компоненты;
② шаблон имеет что-то неправильное.
Предложения:
① Повторно очистить шаблон;
② Определите количественное содержание шаблона и его целостность;
③ Увеличить время реакции;
④ Увеличить количество вводимого шаблона;
⑤ Попробовать другие промоторы и РНК-полимеразы.
---