Данный продукт представляет собой РНК-полимеразу бактериофага Т7, полученную путем экспрессии рекомбинантного белка в Escherichia coli. Она катализирует 5'→3' синтез РНК на двухцепочечной ДНК с последовательности промотора T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') и использует NTP в качестве субстратов. ДНК с двухцепочечными линейными тупыми или 5'выступающими концами может быть использована в качестве шаблонов для РНК-полимеразы Т7, поэтому линеаризованные плазмиды и продукты ПЦР могут быть использованы в качестве шаблонов для синтеза РНК in vitro.
Примечание: G* - первое основание транскрипта РНК.
Данный продукт производится в соответствии с нормами GMP и поставляется в жидкой форме.
Характеристика
Синтез длинных транскриптов и коротких транскриптов, РНК может быть произведено 100-200 мкг с 1 мкг шаблона ДНК
Высокая производительность и простота в эксплуатации
Меньше эндотоксинов
Проверено на отсутствие эндонуклеаз, экзонуклеаз, РНКаз
Применение
Приготовление радиомеченых РНК-зондов
Генерация РНК для изучения структуры, процессинга и катализа РНК
Контроль экспрессии с помощью антисмысловой РНК
Спецификация
Источник - рекомбинантная E. coli с геном РНК-полимеразы T7
Оптимальная температура - 37℃
Буфер для хранения - 50 мМ Трис-HCl, 1 мМ ЭДТА, 10 мМ ДТТ, 100 мМ NaCl, 0,1% Тритон Х-100, 50% (v/v) глицерин, pH7,9 при 25℃
Определение единицы - Количество фермента, необходимое для включения 1 нмоль [3H] GMP в кислоторастворимый осадок в течение 1 часа при 37°C и pH 8,0, определяется как 1 единица.
---