Набор реактивов в растворе CellAmp™ Whole

для исследованийдля PCRдля нуклеиновых кислот

Набор CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 позволяет перейти от клеток к кДНК, готовой для анализа методом ПЦР в реальном времени. При использовании традиционных методов работы со следовыми количествами нуклеиновых кислот частой проблемой является потеря продукта на этапах очистки. Однако этот набор для превращения клеток в кДНК обеспечивает хороший выход продукта, так как не требуется проведение этапов очистки РНК и кДНК, приводящих к потерям. Процедура начинается с лизиса клеток, после чего проводится реакция обратной транскрипции с адаптерным праймером dT (RT dT Primer 2) для синтеза кДНК из мРНК. Затем с помощью терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TdT) к синтезированной кДНК добавляется хвост dA. Полученный продукт кДНК с 3' dA-хвостом используется в качестве прямого шаблона для ПЦР, что позволяет сократить количество необходимых циклов амплификации. Помимо перехода от клеток к кДНК, этот продукт может быть использован для амплификации кДНК из следовых количеств РНК. В наборе CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 используется дополнительный этап обработки экзонуклеазой I, который помогает подавить неспецифическую амплификацию, вызванную праймерами, и увеличить выход низкоэкспрессируемых генов Набор CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver. 2 позволяет проводить прямую амплификацию кДНК из небольшого количества клеток. Амплифицированная кДНК может быть использована в качестве шаблона для ПЦР в реальном времени. При использовании обычных методов работы со следовыми количествами нуклеиновых кислот частой проблемой является потеря нуклеиновой кислоты на этапах очистки. Однако данный набор обеспечивает хороший выход, так как не требует проведения этапов очистки РНК и кДНК, приводящих к потерям.