Быстрый анализ включает в себя простой протокол с двумя реагентами и добавлением
Субстрат реагирует непосредственно с H2O2; нет необходимости в использовании HRP в качестве соединительного фермента
Обзор
ROS-Glo™ H₂O₂ Assay - это гомогенный, быстрый и чувствительный биолюминесцентный анализ, который измеряет уровень перекиси водорода (H₂O₂), реактивного вида кислорода (ROS), непосредственно в культуре клеток или в определенных ферментных реакциях. Дериватизированный люцифериновый субстрат инкубируется с образцом и вступает в прямую реакцию с H₂O₂ с образованием предшественника люциферина. Добавление раствора ROS-Glo™ Detection Solution преобразует предшественник в люциферин и дает Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase световой сигнал, пропорциональный уровню H₂O₂, присутствующему в образце.
Субстрат H₂O₂ реагирует непосредственно с H₂O₂ для создания предшественника люциферина. Раствор для обнаружения субстрата ROS-Glo™ преобразует предшественник люциферина в люциферин, а также обеспечивает люциферазу Ultra-Glo™ для получения света. Световой сигнал пропорционален количеству H₂O₂ в лунке с образцом.
Обзор протокола анализа ROS-Glo™ H₂O₂ для клеточного или биохимического обнаружения
Анализ проводится по простому протоколу с добавлением двух реагентов, который не требует манипуляций с образцами. Субстрат ROS-Glo™ H₂O₂ может быть добавлен в лунки вместе с обработкой или в конце периода инкубации, и данные могут быть зарегистрированы менее чем через 2 часа после добавления реагента.
Проведение ферментативных или клеточных анализов в 96- и 384-луночных планшетах
Обработка клеток K562 менадионом привела к концентрационно-зависимому увеличению ROS, что было обнаружено с помощью ROS-Glo™ H₂O₂ Assay.
---