Набор для тестов клеточная жизнедеятельность CellTiter-Fluor™

цитотоксичностьдля медицинских исследованийна протеазу

Мультиплексирование со многими другими люминесцентными анализами Нормализация данных по количеству живых клеток делает результаты более сопоставимыми с другими данными Принцип работы анализа CellTiter-Fluor™ Cell Viability Assay - это нелитический флуоресцентный анализ с добавлением одного реагента, который измеряет относительное количество жизнеспособных клеток в популяции. Анализ основан на измерении консервативной и конститутивной протеазной активности в живых клетках и поэтому служит биомаркером жизнеспособности клеток. Активность протеазы в живых клетках ограничена интактными жизнеспособными клетками и измеряется с помощью флуорогенного пептидного субстрата (Gly-Phe-AFC), проницаемого для клеток. Субстрат попадает в интактные клетки, где расщепляется под действием протеазы живой клетки, генерируя флуоресцентный сигнал, пропорциональный количеству живых клеток. Протеаза живой клетки становится неактивной после потери целостности мембраны и утечки в окружающую культуральную среду. Мультиплексирование с помощью CellTiter-Fluor™ Assay CellTiter-Fluor™ Assay также можно использовать в формате мультиплексного анализа в одной лунке, последовательно с другими последующими химическими анализами для нормализации данных по количеству клеток. Данные анализа могут служить в качестве внутреннего контроля и позволяют выявить ошибки, вызванные скоплением клеток или цитотоксичностью соединений. В примере справа показано, что иономицин и PMA совместно стимулируют экспрессию NFAT-зависимых генов, однако более высокая концентрация иономицина приводит к снижению экспрессии. Одновременный мониторинг жизнеспособности с помощью CellTiter-Fluor™ Assay показывает, что снижение экспрессии связано с уменьшением количества жизнеспособных клеток.