Прокладывает путь к функциональному анализу конкретного исследовательского вопроса.
Предполагаемое использование
Данный набор FluoroSpot Path предназначен для подсчета клеток, секретирующих человеческие IFN-γ и IL-2 в ответ на пептиды ТБ, с помощью анализа FluoroSpot. Только для исследовательского использования. Не предназначен для использования в диагностических процедурах.
Состав пула пептидов
Сканирующие пулы состоят из синтетических пептидов 15-меров, перекрывающихся по 11 аминокислотам и охватывающих полные белки. Сканирующий пул ESAT-6 получен из раннего секреторного антигенного белка-мишени и содержит 21 пептид. Сканирующий пул CFP-10 получен из белка культурального фильтрата и содержит 23 пептида. Наконец, пул сканирования EspC получен из секреторно-ассоциированного белка ESX-1 и содержит 23 пептида.
Производительность
КМП человека (250 000 клеток/лунку), полученные от человека с латентным туберкулезом, инкубировали в течение ночи в отсутствие или в присутствии сканирующих пулов ESAT-6 и CFP-10 (Mabtech). Количество клеток, секретирующих IFN-γ и/или IL-2, анализировали методом FluoroSpot. Определяли как одиночные клетки, секретирующие цитокины, так и клетки с двойной секрецией. Для идентификации пятен от клеток с двойной секрецией использовался центр пятен, визуализированный в наложении изображений LED490, FITC (IFN-γ) и LED550, Cy3 (IL-2). Анализ пятен проводился с помощью программы Mabtech IRIS.
IFN-γ
Описание аналита -
Интерферон-γ (IFN-γ) является единственным интерфероном II типа. Этот провоспалительный цитокин секретируется активированными Т-клетками и NK-клетками. Он активирует макрофаги и эндотелиальные клетки и регулирует иммунный ответ, воздействуя на APC, T-клетки и B-клетки. Продукция IFN-γ хелперными Т-клетками и цитотоксическими Т-клетками является отличительной чертой фенотипа Th1.
---