Реактив в растворе NI™

бычий сывороточный альбуминдля лабораторийдля протеинов

На сайте Protocols.io представлена интерактивная версия этого протокола, где вы можете обнаружить оптимизацию и поделиться ею с исследовательским сообществом. Высокочувствительный колориметрический анализ белка, который преодолевает интерференцию обычных лабораторных агентов, присутствующих в белковых растворах, и показывает минимальную вариацию от белка к белку. На анализ не влияет присутствие распространенных лабораторных агентов, таких как восстановители, хелатирующие агенты, детергенты, амины, сахара, хаотропы, соли, лекарства, антибиотики, кобальт и другие распространенные лабораторные агенты (см. таблицы 1 и 2). Анализ белков NI™ состоит из двух простых этапов: Универсальный осаждающий белок агент (UPPA™) добавляется в растворы белков для быстрого осаждения общего белка. Белок иммобилизуется центрифугированием, а мешающие агенты в супернатанте отбрасываются. Концентрацию белка определяют путем смешивания с щелочным раствором, содержащим известную концентрацию соли меди; ионы меди связываются с пептидной основой, и анализ измеряет количество несвязанных ионов меди (см. рис. 2). Анализ не зависит от боковых цепей белка, что сводит к минимуму различия между белками (см. рис. 3). Плотность окраски обратно пропорциональна количеству белка. Для анализа используется традиционный белковый стандарт бычьего сывороточного альбумина (BSA) или белковый стандарт неживотного происхождения. Характеристики Линейный отклик 0,5 мкг-50 мкг белка Малая потребность в образцах, всего 1-50 мкл Не подвержен влиянию небелковых химических веществ и агентов Время протокола: ~30 минут Длительный срок хранения Применение Оценка белка при очистке белка, электрофорезе, клеточной биологии, молекулярной биологии и других исследовательских приложениях.