Реактив антитела TurboGFP-Trap

для биохимииклеточной визуализациидля протеинов

Флуоресцентные белки слияния являются популярными инструментами для изучения локализации белков и клеточной динамики. Эти конструкции обычно соединяют весь целевой белок или, по крайней мере, его функциональный домен с одним из многих типов репортерных флуоресцентных белков. Димерный зеленый флуоресцентный белок TurboGFP получен из зеленого флуоресцентного белка CopGFP копепода Pontellina plumata (Shagin et al., 2004). Он обладает ярко-зеленой флуоресценцией с максимумом возбуждения при 482 нм и максимумом эмиссии при 502 нм. TurboGFP является быстро созревающим белком - его флуоресцентный сигнал внутри клетки становится заметным раньше, чем у других зеленых флуоресцентных белков. TurboGFP имеет лишь около 20 % идентичности последовательности с вариантами GFP медузы. Поэтому большинство анти-GFP антител не связываются с TurboGFP - включая наши GFP-Nanobody, используемые в GFP-Trap. Изображать клетки с помощью конструкции TurboGFP-fusion protein легко, однако для получения полной картины данные визуализации часто сочетаются с дополнительной биохимической информацией об интересующем белке (или белковом домене). Для таких биохимических экспериментов обычно конструируется второй слитый белок с использованием другого домена "метки", который позволяет проводить очистку. Эти дополнительные анализы in vitro могут быть использованы для подтверждения функциональности "меченой" конструкции слияния, а также для выделения мультибелковых комплексов, которые могут образовываться в клеточной среде. Отсутствие специфических, надежных и эффективных реагентов ограничивает использование GFP и родственных флуоресцентных белков слияния как в исследованиях клеточной биологии, так и в прямом биохимическом анализе.