Данный продукт представляет собой однопробирочную мастер-смесь для удаления геномной ДНК и обратной транскрипции, которая позволяет проводить удаление геномной ДНК и синтез кДНК одновременно в одну стадию, эффективно избегая риска загрязнения образца и деградации РНК, вызванной сложными добавками. Продукт содержит высокоэффективную обратную транскриптазу RScript II, которая синтезирует первую нить кДНК из очень малого количества общей РНК или поли(А) мРНК, что делает его пригодным для обратной транскрипции РНК-шаблонов с высоким содержанием ГЦ и сложной структурой. Фермент обладает значительно улучшенной термостабильностью, способен выдерживать температуру реакции до 65°C и достигать более высокого выхода синтезированной кДНК. При добавлении термочувствительной дсДНК остатки геномной ДНК могут быть удалены из образца при комнатной температуре. Инактивация при 50°C не влияет на кДНК. Оптимизированный буфер 5×RScript II All-in-One RT Buffer предварительно смешивается со случайными праймерами и олиго18 (dT), совместимыми с геномным перевариванием и синтезом кДНК. Обратные транскрипты совместимы с qPCR с красителем и зондом для последующего анализа экспрессии генов.
Эффективность обратной транскрипции RK003-0050
Используя 100 нг, 10 нг и 1 нг РНК клеток Hela в качестве шаблонов, RK003-0050 сравнивали с двумя конкурентами в реакциях обратной транскрипции с последующей qPCR. Кривые амплификации показали отличную производительность, особенно при низких концентрациях шаблонов, превосходя конкурентов.
---