Переваривание ферментами рестрикции
Определение единицы - Одна единица определяется как количество фермента, необходимое для переваривания 1 мкг фрагментов λ ДНК (HindIII digest) за 1 час при 37°C в общем реакционном объеме 50 мкл.
Условия хранения - 10 мМ Трис-HCl, 50 мМ KCl, 1 мМ DTT, 0,1 мМ EDTA, 200 мкг/мл BSA, 50% глицерина, pH 7,4 @ 25°C
Условия реакции - 1X буфер CutS, инкубировать при 37°C.
Реакционный буфер или смесь - 1X Buffer CutS:
50 мМ ацетат калия, 20 мМ Трис-ацетат, 10 мМ ацетат магния, 100 мкг/мл БСА, pH 7,9 @ 25°C
Тепловая инактивация - 65°C в течение 20 мин
Чувствительность к метилированию -
метилирование плотины - не чувствительно
метилирование dcm - не чувствительно
Метилирование CpG - нарушено
---