ABScript II cDNA First Strand Synthesis Kit содержит две оптимизированные смеси, ABScript II Enzyme Mix и ABScript II Reaction Mix. Ферментная смесь объединяет обратную транскриптазу ABScript II и ингибитор РНКазы, а реакционная смесь содержит оптимизированный буфер. ABScript II Reverse Transcriptase - это рекомбинантная обратная транскриптаза M-MuLV со сниженной активностью RNase H и повышенной термостабильностью. Она может использоваться для синтеза кДНК первой нити при более высоких температурах, чем M-MuLV дикого типа. Фермент активен до 48°C, что обеспечивает более высокую специфичность и более высокий выход кДНК.
В набор также входят два оптимизированных праймера для обратной транскрипции и вода, не содержащая нуклеазы. Якорный праймер Oligo-dT [d(T)23VN] заставляет праймер отжигать к началу хвоста полиА. Оптимизированная смесь случайных праймеров обеспечивает случайные и последовательные участки праймирования, охватывающие все шаблоны РНК, включая как мРНК, так и неполиаденилированные РНК. Генерируемый продукт кДНК первой нити достигает 10 кб.
Особенности продукта
Низкая активность РНКазы Н благоприятна для синтеза длинных фрагментов кДНК, с помощью которой можно синтезировать кДНК размером до 10 Кб.
Оптимальная температура фермента составляет 42℃, и фермент сохраняет высокую активность при 48℃.
Выход специфической кДНК был выше, чем у обычной обратной транскриптазы M-MLV (37℃).
Подходит для обнаружения коронавирусов;
С различными праймерами RT, как мРНК, так и нцРНК могут быть использованы в качестве шаблонов для обратной транскрипции.
---