Быстрая процедура окрашивания для классификации бактерий на основе характеристики их клеточной стенки. По результатам окрашивания бактерии можно разделить на две различные группы - грамположительные (фиолетовые) и грамотрицательные (красные).
Принцип:
Пятно Грама было разработано эмпирическим путем Кристианом Грамом, датским врачом, в 1884 году. Когда бактерии окрашиваются определенными основными красителями (например, кристаллическим фиолетовым в Rapid Gram Stain), клетки с высоким содержанием пептидогликана (грамположительные) в клеточной стенке сопротивляются обесцвечиванию органическими растворителями, такими как этанол или ацетон, в то время как грамотрицательные виды (с тонким слоем пептидогликана в клеточной стенке) легко обесцвечиваются.
Методы:
1. Окрасьте предметное стекло кристаллическим фиолетовым в течение 10 секунд. Осторожно промойте водой, а затем удалите излишки воды.
2. Нанесите раствор йода на 10 секунд. Осторожно промойте водой, а затем удалите излишки воды.
3. Добавьте обесцвечивающее средство на 10~20 секунд. Аккуратно промойте водой, а затем удалите излишки воды.
4. Контрастируйте раствором сафранина в течение 10 секунд. Осторожно промойте водой.
5. Промокните слайд с образцами бибуляжной бумагой (или дайте высохнуть на воздухе), а затем рассмотрите слайд под микроскопом.
---