Реактив фермент GspSSD2.0

для изотермической амплификацииLAMP kit

Самый быстрый в мире мастермикс для LAMP и RT-LAMP. Разработанная компанией OptiGene мастер-смесь для самой быстрой изотермической амплификации ДНК и РНК. Содержит нашу запатентованную новую ДНК-полимеразу GspSSD LF, усовершенствованную с помощью in-silico дизайна. Нативная активность обратной транскриптазы обеспечивает быструю одноферментную RT-LAMP. ДНК-мишень (VKORC1) амплифицировали из гДНК человека (Sigma). реакции LAMP в объеме 25 мкл проводились при 65ºC в течение 60 минут на термоциклере реального времени (Roche LC-480) в двух экземплярах. Время достижения результата" определяется как время, при котором значение флуоресценции амплификата достигает порога в 10% от максимальной флуоресценции. Изотермические мастер-смеси OptiGene (ISO-001 и ISO-004) сравнивались с набором WarmStart LAMP Kit (DNA & RNA) компании NEB [Lot:0021609]. ISO-001 и ISO-004 НЕ содержат специфического фермента обратной транскриптазы (RT). Для корректного сравнения со смесью NEB (содержащей отдельный специфический фермент обратной транскриптазы) в реакции OptiGene Master Mix (ISO-001 inc. RT и ISO-004 inc. RT) было добавлено 0,5U AMV-RT. Стандартные реакции ISO-001 и ISO-004 RT-LAMP также сравнивались, чтобы продемонстрировать превосходную обратную транскриптазную активность смеси. РНК-мишень (бета-актин) амплифицировали из тотальной РНК человека (Ambion). реакции RT-LAMP объемом 25 мкл проводили при 65ºC в течение 60 минут на термоциклере реального времени (Roche LC-480) в двух экземплярах. Время достижения результата" определялось как время, при котором значение флуоресценции амплификации достигает порога в 10% от максимальной флуоресценции.