Ni Focurose FF (TED) - это метод очистки, использующий для разделения и очистки взаимодействие Ni2+ с некоторыми аминокислотами (в первую очередь гистидином, цистеином и триптофаном) на боковых цепях белков. Он подходит для очистки His-меченых белков и других биомолекул, взаимодействующих с Ni2+. Сильное хелатирующее свойство Ni2+ позволяет напрямую использовать ее для очистки His-меченых белков, экспрессируемых в эукариотических секреторных системах, перенося более высокие уровни восстановителей и хелаторов без необходимости предварительной обработки образцов. Смола легко очищается и регенерируется без отщепления никеля, что позволяет проводить прямую очистку NaOH.
Характеристики
Быстрота и простота (одноэтапная очистка)
Выдерживает более высокие уровни восстановителей и хелаторов, позволяя напрямую применять His-меченые белки, экспрессированные в эукариотических системах секреции, без предварительной обработки, максимально сохраняя активность белка.
Нет необходимости в никелевой зачистке, что позволяет проводить прямую очистку NaOH, значительно сокращая цикл очистки.
Более низкий уровень выщелачивания никеля по сравнению с традиционными Ni Focurose FF (IDA) и Ni FocuroseFF (IMAC), что устраняет необходимость в повторной регенерации.
Параметры работы
Высокосшитая 6% агароза
Диапазон размеров частиц
45-165 мкм
Средний размер частиц (D50)
90±5 мкм
Связывающая способность
≥10 мг (His-тегированный белок)/мл (смола)
стабильность рН
3-12 (долгосрочно) 2-14 (краткосрочно)
Химическая стабильность
0.01M HCl, 0.01M NaOH (одна неделя)
20mM EDTA, 10mM DTT, 1M NaOH, 8M мочевина, 6M HCl гуанидин (24 часа)
100мМ ЭДТА, 0,5М имидазол (2 часа) 30% изопропанол (20 минут)
Линейная скорость потока (0,3 МПа)
≥300 см/ч
---