Технология ClonExpress — это простой, быстрый и высокоэффективный метод бесшовного клонирования ДНК. Она позволяет осуществлять направленное клонирование вставных фрагментов в любой сайт любого вектора. Для линеаризации вектора можно использовать любой метод, а конечную последовательность линеаризованного вектора следует ввести в 5'-конец праймера для прямой/обратной амплификации вставного фрагмента, таким образом, чтобы 5'- и 3'-концы продукта ПЦР имели те же концевые последовательности (15–20 п.н.), что и линеаризованный вектор, соответственно. Продукт ПЦР и линеаризованный вектор смешивают в определённой пропорции. Под действием рекомбиназы трансформацию можно проводить при 37 °C в течение 30 мин для завершения направленного клонирования.
ClonExpress II — это набор для рекомбинантного клонирования нового поколения. Он обладает уникальной лигазонезависимой системой, которая значительно снижает уровень самолигирования вектора, а доля положительных результатов может достигать более 95 %. Высокооптимизированный реакционный буфер и усовершенствованная рекомбиназа Exnase II позволяют значительно повысить эффективность рекомбинации и устойчивость к примесям. Эти особенности позволяют использовать линеаризованные векторы и вставки непосредственно для рекомбинантного клонирования без очистки, что значительно упрощает этапы эксперимента.
Особенности
Высокая эффективность: без лигазы, без самолигирования, доля положительных результатов >95%
Широкая совместимость: эффективное клонирование фрагментов ДНК размером от 50 п.н. до 10 кб; применимо для одиночных фрагментов
Дополнительные особенности: нет необходимости учитывать сайты рестрикции фрагментов вставки
Программная поддержка: предоставляется онлайн-программа для дизайна праймеров «CE Design»
---