Основной набор SMART-Seq HT Kit (SS-HT) и набор SMART-Seq HT PLUS Kit (SS-HT PLUS) - это удобные для автоматизации наборы, которые используют прайминг олиго(dT) для получения высококачественной полноразмерной кДНК непосредственно из 1-100 клеток или 10 пг-1 нг тотальной РНК. Помимо основного набора для синтеза кДНК, набор SS-HT PLUS также включает набор для подготовки библиотек и одноразовые уникальные планшеты с двойным индексом (UDI) для создания библиотек секвенирования, совместимых с Illumina, что делает его полным комплексным решением.
Набор для синтеза кДНК SS-HT имеет упрощенный протокол, оптимизированный для работы после FACS, и сокращает время работы по сравнению с наборами SMART-Seq v4, благодаря удобному комбинированному этапу обратной транскрипции и ПЦР-амплификации. Технология SMART (Switching Mechanism at 5' End of RNA Template), лежащая в основе синтеза кДНК, обеспечивает покрытие полноразмерного транскрипта, что делает его мощным инструментом для изучения экспрессии генов в одиночных клетках, включая сплайс-переходы и альтернативный сплайсинг. Прайминг Oligo(dT) используется для специфической амплификации мРНК из высококачественной тотальной РНК (RIN >8) или интактных клеток. Технология LNA повышает эффективность переключения шаблонов, что увеличивает количество идентифицированных генов по сравнению с другими методами.
Набор SS-HT PLUS включает нашу запатентованную химию подготовки библиотек, которая использует ферментативную фрагментацию и адаптеры со стебельчатой петлей для создания высококачественных библиотек, совместимых с Illumina, из кДНК, синтезированной с помощью основного набора. Этот двухэтапный процесс происходит в одной пробирке и может быть завершен примерно за два часа - никаких промежуточных этапов очистки не требуется.
---