Иммуноферментный анализ CBIACTH - это двухсайтовый люмелиз (хемилюминесцентный иммуноферментный анализ) для измерения биологически активной 39-аминокислотной цепи АКТГ. Козье поликлональное антитело к АКТГ, очищенное методом аффинной хроматографии, и мышиное моноклональное антитело к АКТГ специфичны для четко определенных областей молекулы АКТГ. Одно антитело готовится для связывания только С-конца АКТГ 34-39, и это антитело биотинилировано. Другое антитело готовится для связывания только средней области и N-конца АКТГ 1-24, и это антитело маркируется пероксидазой хрена [HRP] для обнаружения. В этом анализе калибраторы, контроли или образцы одновременно инкубируются с антителом, меченным ферментом, и антителом, связанным с биотином, в лунке микропланшета, покрытой стрептавидином. По окончании инкубации микропланшет промывают для удаления несвязавшихся компонентов. После добавления субстрата люминола активность фермента в связанной с ферментом фракции прямо пропорциональна концентрации АКТГ в образце. Готовится стандартная кривая, связывающая единицу света (RLU) с концентрацией АКТГ. Концентрация АКТГ, присутствующего в контроле и образцах, определяется непосредственно по этой кривой.
---