Реактив ДНК-полимераза Titan HotTaq

для исследованийдля PCR

ДНК-полимераза Titan HotTaq (рис. 1) представляет собой модифицированную ДНК-полимеразу Titan Taq. При температуре окружающей среды она неактивна и не обладает полимеразной активностью. ДНК-полимераза Titan HotTaq активируется 15-минутной инкубацией при 95-97°C, предотвращая удлинение неспецифически отожженных праймеров и праймер-димеров, образующихся при низких температурах во время постановки ПЦР. Фермент обладает 5' - 3' полимеризационно-зависимой экзонуклеазной активностью, но не обладает 3' - 5' экзонуклеазной активностью. Фермент обладает "экстендазной активностью", позволяющей клонирование TA. Концентрация: 5 единиц/мкл Определение единицы: Одна единица определяется как количество фермента, необходимое для катализа включения 10 нмоль dNTP в кислоторастворимую форму за 30 минут при 74°C. Источник: Очищен из штамма E. coli, несущего сверхпродуцирующую плазмиду, содержащую модифицированный ген ДНК-полимеразы Thermus aquaticus. Контроль качества: Фермент свободен от активности никинга и прайминга, экзонуклеаз и неспецифических эндонуклеаз. SDS/PAGE - полоса 95 кД, чистота >98%. Активность и стабильность проверены с помощью термоциклирования. Уровень ошибок на нуклеотид за цикл составляет ~ 2,5 x 10-5; точность ~ 4 x 104. Расчетный период полураспада при 95°C составляет 1,5 часа. Хранение и буфер для разбавления: 50% глицерин (v/v), 20 мМ Трис-HCl pH 8,7 при 25°C, 100 мМ KCl, 0,1 мМ ЭДТА и стабилизаторы. Поставляется с: 10-кратный реакционный буфер 1 (Mg2+, без моющих средств) Tris-HCl и (NH4)2SO4 10x Реакционный буфер 2 (без Mg2+) Трис-HCl, (NH4)2SO4 и детергент 25 мМ MgCl2 10x Enhancer - добавка, облегчающая амплификацию сложных шаблонов (например, GC-богатых шаблонов ДНК).