Окрашивающий раствор Ponceaus S - это готовое к использованию окрашивание мембран для оценки эффективности переноса вестерн-блота. Это пятно рекомендуется для быстрого и обратимого окрашивания белков на нитроцеллюлозных или PVDF-мембранах. Окрашивание Ponceau S обратимо и может быть удалено короткой инкубацией в 0,1% NaOH.
Раствор Понсо S можно использовать для оценки общего количества белка или эффективности переноса на нитроцеллюлозные и ПВДФ-мембраны. ПВДФ-мембрану окрашивают Ponceau S в течение 5 минут и промывают ddH2O в течение 3 минут. Она дает видимые розовые полосы.
Полоса 1, 13: предварительно окрашенная белковая лестница #PM019-0500
Полосы 2-7: 2-кратные разведения неокрашенного белка #PMU12-0500
Полосы 8-12: 2000, 1000, 500, 100, 50 нг BSA
Необходимые материалы, но не предоставляемые
Контейнер: коробка для окрашивания геля
Шейкер: орбитальный или качающийся шейкер
Установка реакции
После переноса геля SDS-PAGE на нитроцеллюлозную или PVDF-мембрану поместите ее в контейнер для окрашивания.
Погрузите мембрану в соответствующее количество раствора для окрашивания белков Ponceau S, достаточное для покрытия всей мембраны. Слегка перемешивайте контейнер для окрашивания в течение 5-15 минут при комнатной температуре. Белковые полосы окрасятся и станут видны через 5-15 минут.
Смойте излишнее окрашивание с мембраны водой DI, пока белковые полосы не станут прозрачными.
Для дальнейшего блокирования мембраны удалите с нее окрашивающий раствор Понсо S, поместив мембрану в 20 мл 0,1% NaOH на 1-2 минуты, затем промойте в DI воде на 1-2 минуты.
---