Одношаговое клонирование Vazyme ClonExpress II - это простая, быстрая и высокоэффективная технология клонирования, позволяющая осуществлять направленную вставку любого продукта амплифицированной ДНК в любой линеаризованный вектор в любом месте. Сначала вектор линеаризуется в месте клонирования. Небольшая последовательность, перекрывающаяся с каждым концом сайта клонирования, добавляется к вставке с помощью ПЦР. Вставка и линеаризованный вектор с перекрывающимися последовательностями 15 п.н. - 20 п.н. на 5'- и 3'-концах, соответственно, смешиваются в соответствующем соотношении и инкубируются с рекомбиназой Exnase II при 37℃ в течение 30 мин.
ClonExpress II - это новый набор для клонирования, не зависящий от ДНК-лигазы, значительно снижающий количество самолигированных колоний и обеспечивающий истинно положительный результат > 95%. Усиленная Exnase II и оптимизированный буфер значительно повышают эффективность рекомбинации и устойчивость к примесям. И линеаризованный вектор, и продукты ПЦР вставки могут быть непосредственно использованы для рекомбинации без очистки, что значительно упрощает процедуры.
Особенности продукта
Простой, быстрый, эффективный, подходит для любого носителя;
Нет необходимости учитывать сайт рестрикции, переносимый вставкой;
Эффективное клонирование фрагментов ДНК размером 50 bp-10 kb;
Линеаризованный клонирующий вектор и продукты ПЦР могут быть клонированы непосредственно без очистки;
Без лигазы, без самосоединения, положительный процент >95%.
---