Данный продукт содержит кэппинг-фермент вируса вакцинии, 2'-O-метилтрансферазу кэп-структуры мРНК и другие компоненты реакции кэппинга, которые могут быть использованы для модификации 5' кэппинга РНК, полученной с помощью транскрипции T7 in vitro (JT101).
У эукариот после транскрипции для образования исходной мРНК на 5' конце необходимо сформировать специальную кэп-структуру. Эта структура играет важную роль в стабильности, транспорте (выходе) и трансляции мРНК. Простым и эффективным методом является кэппинг-модификация 5' конца РНК с помощью ферментативной реакции кэппинг-ферментов: Кэппинг-фермент вакцины может присоединять 7-метилгуанилатный кэп (m7Gppp, Cap0) к 5' концу РНК с образованием m7Gppp5'N-мРНК (Cap0-мРНК). МРНК Cap 2'-O-метилтрансфераза использует CAP0-мРНК в качестве субстрата и SAM (S-аденозинметионин) в качестве донора метила для метилирования 2'-oh первого нуклеотида 5' конца Cap0-мРНК, прилегающего к кэп-структуре, с образованием Cap1-мРНК.
Кэп1-структура позволяет повысить стабильность мРНК, что способствует повышению ее экспрессионной способности в экспериментах по трансфекции клеток и микроинъекции.
В данном продукте в реакции кэпирования одновременно используются кэппинг-фермент вируса вакцинии и кэп-2'-O-метилтрансфераза мРНК, что позволяет завершить реакцию кэпирования в одной и той же реакции. Продуктом реакции является Cap1-мРНК, а эффективность кэпирования может быть близка к 100% при правильной ориентации кэпа.
Доставка
Сухой лед (-70 ℃)
---