В анализах на основе измерения флуоресценции, таких как ПЦР в реальном времени (qPCR), при использовании небольших объёмов особенно актуальны преимущества улучшенных отражательных свойств белых расходных материалов для ПЦР. Тем не менее, в настоящее время при проведении qPCR чаще применяются прозрачные материалы. Узнайте здесь, как можно легко улучшить результаты qPCR.
Как использование белых ПЦР-пробирок влияет на воспроизводимость?
Благодаря максимальному отражению белых пробирок флуоресцентный свет «не теряется» в стенках лунок и, соответственно, количество флуоресцентного света, достигающего детектор, более постоянно, чем при использовании прозрачных изделий. В результате достигается снижение рассеяния при обнаружении вторых и третьих экземпляров и при повторе экспериментов. Прозрачный и
Как можно добиться улучшенного соотношения сигнал / фон?
Ввиду в несколько раз более высокого уровня флуоресценции белых расходных материалов для ПЦР и неизменных фоновых эффектов из-за используемого люминофора достигается улучшенное соотношение сигнал / фон в белых пробирках.
Можно ли избежать взаимных помех («crosstalk») между отдельными лунками?
При использовании прозрачных лунок может происходить детектирование флуоресценции от соседних лунок из-за рассеяния флуоресцентного света. Благодаря полной светонепроницаемости белых расходных материалов детекторы флуоресценции в термоциклере не могут обнаруживать сигналы флуоресценции от соседних лунок.
Как использование белых ПЦР-пробирок влияет на чувствительность ПЦР?
На этом вопросе мы хотели бы остановиться подробно, на примере сравнительного эксперимента qPCR. Показанный на рис.