Этот набор HTRF позволяет проводить количественное определение фосфорилированного STING в клетках мыши в качестве показателя активации пути cGAS-STING.
OverView
Этот клеточный HTRF-анализ удобно и точно количественно определяет фосфорилированный STING мыши на Ser365. После инфицирования патогеном и связывания дсДНК с цитоплазматическим сенсором cGAS белок STING фосфорилируется TBK1. Это позволяет ему связываться с IRF3, который индуцирует выработку IFNs 1 типа и другие иммунные реакции. Затем путь STING выключается путем деградации STING с участием аутофагии.
Другие характеристики
Размер блока 500 точек анализа
Как это работает
Принцип работы анализа мышиного фосфо-STING (Ser365)
Мышиный фосфо-STING (Ser365) измеряет уровень мышиного STING при фосфорилировании на Ser365. В отличие от Вестерн-блота, этот анализ полностью основан на пластинах и не требует гелей, электрофореза или переноса. Для анализа мышиного фосфо-STING (Ser365) используются 2 меченых антитела: одно с донорским флуорофором, другое - с акцепторным. Первое антитело выбирается для специфического связывания с фосфорилированным мотивом белка, второе - для способности распознавать белок независимо от состояния его фосфорилирования. Фосфорилирование белка позволяет образовать иммунокомплекс с участием двух меченых антител. В результате донорный флуорофор оказывается в непосредственной близости от акцепторного, генерируя сигнал FRET. Его интенсивность прямо пропорциональна концентрации фосфорилированного белка в образце и позволяет оценить состояние фосфорилирования белка в формате анализа без промывки.
---