Данный набор для ИФА использует принцип конкурентного ИФА. Микропланшеты для ИФА, входящие в состав набора, предварительно покрыты 8-OHdG. Стандарты или образцы добавляют в соответствующие лунки микропланшета, затем добавляют конъюгированное с биотином антитело, специфичное к 8-OHdG. Затем в каждую лунку микропланшета добавляют авидин, конъюгированный с пероксидазой хрена (HRP), и инкубируют. После этого добавляют раствор субстрата ТМБ. Фермент-субстратная реакция завершается добавлением раствора серной кислоты, и изменение цвета измеряется спектрофотометрически при длине волны 450 нм ± 10 нм. Затем определяют концентрацию 8-OHdG в образцах, сравнивая OD образцов со стандартной кривой.
Технические данные
Поскольку значения OD стандартной кривой могут варьироваться в зависимости от условий проведения анализа (например, оператор, техника пипетирования, техника промывки или влияние температуры), оператор должен построить стандартную кривую для каждого теста. Типичная стандартная кривая и данные приведены ниже только для справки.
Прецизионность
Внутрианалитическая точность (точность внутри анализа): 3 образца с низким, средним и высоким уровнем были протестированы 20 раз на одном планшете соответственно.
Межанализаторная точность (точность между анализами): 3 образца с низким, средним и высоким уровнем тестировались на 3 разных планшетах, по 20 реплик в каждом планшете, соответственно.
Скорость восстановления
Восстановление шипов с тремя различными уровнями в образцах во всем диапазоне анализа оценивалось в различных матрицах.
Линейный
В образцы добавляли высокие концентрации целевых белков
---