Эмбриональные стволовые (ЭС) клетки - это плюрипотентные клетки, полученные из внутренней клеточной массы бластоцисты. Стволовые клетки могут поддерживаться in vitro в течение длительного времени без потери способности дифференцироваться во все клеточные линии при повторной имплантации обратно в бластоцисту. ES-клетки могут дифференцироваться in vitro в различные типы клеток, включая нейронные, мышечные, эндотелиальные и гемопоэтические предшественники. Общие условия культивирования хорошо установлены и обычно требуют, чтобы ЭС-клетки выращивались на неактивном слое фидерных клеток или с компонентами подвальной мембраны (Матригель, Фибронектин, Ламинин). При выращивании ЭС клеток одним из наиболее важных параметров является поддержание клеток в недифференцированном состоянии. Перед использованием сыворотки для культивирования ЭС-клеток необходимо провести ее предварительный отбор. Различные партии сывороток были отобраны для выращивания ЭС-клеток человека с использованием MEF в качестве фидерного слоя. Для скрининга измеряются следующие параметры:
Морфология колоний ЭС клеток человека
Эффективность размножения
Скорость дифференцировки: анализ поверхностного маркера ЭС клеток человека, экспрессированного на мембране недифференцированных клеток (анализ FACS).
Результаты используются в качестве показателя качества сывороток для роста и поддержания недифференцированных стволовых клеток.
Размораживание
Мы рекомендуем размораживать сыворотку при температуре 2-8ºC. Однако при необходимости вы можете разморозить сыворотку при комнатной температуре. В процессе оттаивания осторожно перемешивайте сыворотку во флаконах.
---