качественное выявление РНК вируса 2019 в образцах верхних дыхательных путей
(назофарингеальные и ротоглоточные экстракты) с помощью систем ПЦР в реальном времени. Он рассматривается как вспомогательное средство в диагностике 2019-вирусной инфекции.
2. Принцип работы RT-PCR в реальном времени
Принцип детекции в реальном времени основан на флуорогенном анализе 5'нуклеазы. В ходе ПЦР-реакции ДНК-полимераза
расщепляет зонд на 5' конце и отделяет репортерный краситель от гасящего только тогда, когда зонд гибридизуется с целевой ДНК.
В результате этого расщепления возникает флуоресцентный сигнал, генерируемый расщепленным репортерным красителем, который отслеживается системой детекции ПЦР в режиме реального времени. Цикл ПЦР, при котором обнаруживается первоначальное увеличение флуоресцентного сигнала (Ct), пропорционален количеству специфического продукта ПЦР. Мониторинг интенсивности флуоресценции в режиме реального времени позволяет обнаружить накапливающийся продукт без необходимости повторного открытия реакционной пробирки после окончания амплификации.
---