Opal™ - это практичный рабочий процесс для одновременного обнаружения до 6 тканевых биомаркеров и ядерного контр-окрашивания на одном изображении. Метод аналогичен стандартной иммуногистохимии и доступен для многих лабораторий, где разрабатываются стандартные методы IHC. Отдельные наборы реагентов Opal Fluorophore позволяют выбрать количество биомаркеров и дизайн панели.
Набор реагентов Opal 780 состоит из двух частей и является частью 7-цветного рабочего процесса для цельных слайдов Phenoptics 2.0. Набор реагентов содержит:
Opal TSA-DIG, 1 флакон
Opal Polaris 780, 1 флакон
Диметилсульфоксид (ДМСО), 1 x 100 мкл
Первичные антитела и другие реагенты для рабочего процесса следует приобретать отдельно. В упаковке содержится достаточное количество реагента для окрашивания до 50 слайдов. Как правило, на один слайд требуется 100-300 мкл рабочего раствора Opal.
Протокол восстановления и разведения Opal TSA-DIG:
Растворите реагент Opal TSA-DIG в 75 мкл ДМСО.
Перед каждой процедурой разводите Opal TSA-DIG в 1X Plus Amplification Diluent для ручного окрашивания или 1X Plus Automation Amplification Diluent для автоматизации, чтобы приготовить рабочий раствор Opal TSA-DIG. Рекомендуемый коэффициент разведения составляет 1:100.
Протокол восстановления и разведения Opal 780:
Растворите реагент Opal 780 в 300 мкл ddH2O.
Перед каждой процедурой разбавляйте Opal 780 в разбавителе для блокирования/аб, чтобы получить рабочий раствор Opal 780. Рекомендуемое соотношение разбавления - 1:25.
Наборы реагентов Opal можно использовать как для моно-, так и для мультиплексного окрашивания тканей, они были настроены и проверены для визуализации на системе количественной патологической визуализации PhenoImager HT (бывшая Vectra® Polaris™).
---